Выделение и культивирование строгих анаэробов и микроаэрофилов

• Строгие анаэробы гибнут в присутствии O2 (Clostridium, Bacteroides).
• Микроаэрофилы требуют 2–10% O2 и 5–10% CO2 (Campylobacter, Helicobacter).
• Методы: анаэростаты, газогенерирующие пакеты, анаэробные боксы.
• Среды: Китта–Тароцци, тиогликолевая, кровяной агар в анаэробных условиях.
• Практическое значение: диагностика газовой гангрены, столбняка, ботулизма, кампилобактериоза, хеликобактериоза.

Строгие анаэробы — микроорганизмы, погибающие в присутствии молекулярного кислорода (O2). Микроаэрофильные бактерии требуют пониженной концентрации O2 (2–10%) и повышенной CO2 (5–10%). Для их выделения и культивирования применяют специальные методы, исключающие контакт с атмосферным кислородом.

Строгие анаэробы: не имеют ферментов защиты от активных форм кислорода (супероксиддисмутазы, каталазы). Примеры: *Clostridium tetani*, *Clostridium botulinum*, *Bacteroides fragilis* (грамотрицательные палочки), *Peptostreptococcus* spp. (грамположительные кокки).

Микроаэрофилы: обладают слабой супероксиддисмутазой, но не каталазой. Примеры: *Campylobacter jejuni* (грамотрицательная изогнутая палочка), *Helicobacter pylori* (грамотрицательная спиралевидная палочка).

Методы создания анаэробных условий:

• Физические: вакуум, замена воздуха инертным газом (N2, Ar, CO2).
• Химические: использование газогенерирующих пакетов (например, AnaeroGen), поглотителей O2 (пирогаллол + NaOH).
• Биологические: совместное культивирование с аэробами (метод Фортнера).
• Смешанные: анаэростаты, анаэробные боксы (перчаточные).

Питательные среды:

• Обогащённые: среда Китта–Тароцци (глюкоза, кусочки печени/мяса), тиогликолевая среда.
• Селективные: для клостридий — среда Вильсона–Блера (сульфит-редукция), для бактероидов — среда с канамицином и ванкомицином.
• Кровяные агары (например, Columbia agar с 5% бараньей крови) в анаэробных условиях.

Методы посева: глубинный посев в столбик агара, посев в анаэростат, использование анаэробных чашек (например, GasPak).

Практическое значение: выделение анаэробов важно при диагностике газовой гангрены (C. perfringens), столбняка (C. tetani), ботулизма (C. botulinum), анаэробных инфекций мягких тканей и абсцессов (Bacteroides, Peptostreptococcus). Микроаэрофилы — возбудители кампилобактериоза (C. jejuni) и язвенной болезни (H. pylori). У детей анаэробные инфекции встречаются при некротизирующем энтероколите, перитоните, абсцессах.

Контроль анаэробиоза: использование индикаторов (метиленовый синий, резазурин) — обесцвечивание в анаэробных условиях.