Бактериофаги: получение, титрование, применение

• Бактериофаги — вирусы бактерий, делятся на вирулентные и умеренные.
• Получение: выделение из природных источников, культивирование на бактериях, очистка.
• Титрование: метод агаровых слоёв, подсчёт бляшек (БОЕ/мл).
• Применение: фаготерапия (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa), фагопрофилактика, фагодиагностика (фаготипирование), генная инженерия.
• У детей — местное применение.

Бактериофаги (фаги) — вирусы бактерий, обладающие строгой специфичностью. По типу взаимодействия с клеткой различают вирулентные (вызывают лизис) и умеренные (интегрируются в геном, образуя профаг). По морфологии выделяют фаги с икосаэдрической головкой и хвостовым отростком (T-чётные фаги Escherichia coli), нитевидные (M13) и другие.

Получение бактериофагов:

1. Выделение из природных источников (сточные воды, фекалии) путём фильтрации через бактериальные фильтры.
2. Культивирование на чувствительных бактериях в жидкой среде (бульонная культура) или на плотной среде (метод агаровых слоёв по Грациа).
3. Очистка и концентрирование (ультрафильтрация, ультрацентрифугирование).

Титрование фага: определение количества активных фаговых частиц (бляшкообразующих единиц, БОЕ). Метод агаровых слоёв: готовят последовательные десятикратные разведения фага, смешивают с бактериальной культурой, высевают на агар; после инкубации подсчитывают зоны лизиса (бляшки). Титр выражают в БОЕ/мл.

Практическое применение:

1. Фаготерапия — лечение инфекций, вызванных антибиотикорезистентными штаммами (например, стафилококковый бактериофаг против Staphylococcus aureus, синегнойный бактериофаг против Pseudomonas aeruginosa).
2. Фагопрофилактика — предупреждение бактериальных инфекций в очагах.
3. Фагодиагностика — идентификация бактерий по специфичности лизиса (фаготипирование, например, для Salmonella typhi).
4. Генная инженерия — использование фагов как векторов (фаг лямбда, M13).
5. Санитарная микробиология — индикация бактерий в объектах окружающей среды.

Особенности у детей: фаготерапия применяется с осторожностью из-за возможных аллергических реакций; предпочтительны местные формы (орошения, аппликации).