Эритроциты, их функции. Регуляция количества эритроцитов. Способы подсчета.

Эритроциты — красные кровяные клетки, функция: транспорт газов (O2, CO2), аминокислот, гормонов; защита (гемостаз, иммунитет); регуляция pH (гемоглобин).

• Норма: мужчины 4,0–5,0×10¹²/л, женщины 3,5–4,7×10¹²/л.
• Форма — двояковогнутый диск, диаметр 7–8 мкм.
• Регуляция: эритропоэтин (почки), железо, витамин B12, фолиевая кислота.
• Подсчёт: в камере Горяева, автоматические анализаторы.

Функции эритроцита:

1. Транспортная (О2 и СО2, а/к, полипептиды, белки, углеводы, ферменты, гормоны, простагландины)
2. Защитная (участие в гемостазе, фибринолизе, в специфическом и неспецифическом иммуните)
3. Регуляторная (регуляция рН – наличие гемоглобина, ионный состав и обмен)

Если же содержание белков в крови уменьшается, то эритроциты отдают их в плазму. Эритроциты являются носителями глюкозы и гепарина, обладающего выраженным противосвертывающим действием.

Эритроциты, или красные кровяные клетки, впервые обнаружил в крови лягушки Мальпиги (1661). Мембрана эритроцита состоит из билипидного слоя, который пронизан гликофорином, белками каналов. Наряду с тем, что мембрана эритроцита проницаема для катионов Nа и К, она особенно хорошо пропускает О2, СО2, СI- и НСО3-. На стороне, обращенной к цитозолю, располагается молекулярная сеть – подмембранный скелет. Подмембранный слой играет важную роль в деформации эритроцитов при прохождении их через узкие капилляры. Дефект белка цитоскелета – анкирина приводит к кеглеобразному изменению формы эритроцитов — сфероцитоз. Сфероциты крайне нестабильны — время жизни составляет около 10 дней, вследствие этого возникает анемия.

Особая форма эритроцитов способствует выполнению ими основной функции – переноса дыхательных газов, так как при такой форме диффузионная поверхность увеличивается, а диффузионное расстояние уменьшается. Кроме того, благодаря своей форме эритроциты обладают большой способностью к обратимой деформации при прохождении через узкие изогнутые капилляры. Это значительно улучшает реологические характеристики крови.

По мере старения клеток уменьшается пластичность эритроцитов. Пластичность понижена и у эритроцитов с патологически измененной формой (у сфероцитов и серповидных эритроцитов).

Распределение эритроцитов по диаметру у здорового человека соответствует кривой Прайс-Джонса. При нарушении эритропоэза происходит сдвиг кривой Прайс-Джонса вправо; речь идет о макроцитозе, т. е. о значительном увеличении числа эритроцитов с диаметром, превышающим 8 мкм. При пернициозной анемии диаметр отдельных эритроцитов (мегалоцитов) иногда превышает 12 мкм.

Сдвиг кривой Прайс-Джонса влево (т.е. существенное увеличение числа красных кровяных клеток с диаметром менее 6 мкм) называют микроцитозом. В этом случае в крови обнаруживаются карликовые эритроциты с укороченным сроком жизни.

Более пологая форма кривой Прайс-Джонса в результате увеличения числа как макроцитов, так и микроцитов характерна для анизоцитоза.

При различных заболеваниях количество эритроцитов может уменьшаться - «эритропения» и часто сопутствует малокровию или анемии. Увеличение числа эритроцитов обозначается как «эритроцитоз». К эритроцитам с характерной патологически измененной формой относятся круглые сфероциты (при сфероцитозе) и серповидные эритроциты (при серповидноклеточной анемии).

Регуляция количества эритроцитов:

Для нормального эритропоэза необходимо железо.

• поступает в костный мозг при разрушении эритроцитов, из депо, а также с пищей и водой.
• Если железа в организм поступает недостаточно, то развивается железодефицитная анемия.

Важным компонентом эритропоэза является медь, которая усваивается непосредственно в костном мозге и принимает участие в синтезе гемоглобина.

• Если медь отсутствует, то эритроциты созревают лишь до стадии ретикулоцита.

Необходимы витамины и в первую очередь витамин В12 и фолиевая кислота.

• Витамин В12 (внешний фактор кроветворения) поступает с пищей.
• Для всасывания витамина В12 требуется внутренний фактор кроветворения (фактор Касла).
• Витамин В12 и фолиевая кислота принимают участие в синтезе глобина.

Все гормоны, регулирующие обмен белков (соматотропный гормон гипофиза, гормон щитовидной железы — тироксин и др.) и кальция (паратгормон, тиреокальцитонин), необходимы для нормального эритропоэза.

• Мужские половые гормоны (андрогены) стимулируют эритропоэз, тогда как женские (эстрогены) — тормозят его, что обусловливает меньшее число эритроцитов у женщин по сравнению с мужчинами.

Эритропоэтины оказывают действие непосредственно на клетки-предшественники эритроидного ряда. Основным стимулятором образования эритропоэтина является гипоксия различного происхождения.

• ускорение и усиление перехода стволовых клеток костного мозга в эритробласты;
• увеличение числа митозов клеток эритроидного ряда;
• ускорение созревания неделящихся клеток — нормобластов, ретикулоцитов.

Способы подсчета:

• цветовой показатель (фарб-индекс) – насыщение в среднем одного эритроцита гемоглобином.

Если у человека содержание гемоглобина и эритроцитов равно 100%, то цветовой показатель равен 1. В норме фарб-индекс колеблется в пределах 0,75—1,0 и очень редко может достигать 1,1. В этом случае эритроциты называются нормохромными. Если цветовой показатель менее 0,7, то такие эритроциты недонасыщены гемоглобином и называются гипохромными. При индексе более 1,1 эритроциты называются гиперхромными. В этом случае объем эритроцита значительно увеличивается, что позволяет ему содержать большую концентрацию гемоглобина. В результате создается ложное впечатление, будто эритроциты перенасыщены гемоглобином. Гипо- и гиперхромия встречаются лишь при анемиях. Определение цветового показателя важно для клинической практики, так как позволяет провести дифференциальный диагноз при анемиях различной этиологии.

- в камере Горяева:

Ход работы. Положить стекло камеры Горяева под объектив микроскопа и рассмотреть сетку камеры под большим и малым увеличением. Накрыть камеру покровным стеклом. Налить 4 мл 3 % раствора натрия хлорида в рабочую пробирку. Протереть 96 % спиртом кожу дистальной фаланги IV пальца левой руки, проколоть ее, снять первую каплю крови сухой ватой, а потом погрузить конец микропипетки в новую каплю и набрать кровь до метки. Если набрано больше крови, то с помощью сухого ватного тампона, притрагиваясь к носику, снять излишек крови. Погрузить кончик микропипетки в 3 % раствор натрия хлорида, который налит в рабочую пробирку. Таким образом кровь будет разбавлена в 200 раз. Осторожно встряхивая, перемешать раствор крови в пробирке, каплю раствора поместить в камеру. Для этого кончик микропипетки поставить возле покровного стекла и легонько нажать на грушу. Раствор зайдет под покровное стекло в камеру и заполнит ее. Подождать 1-2 мин, чтобы эритроциты осели на дно камеры. При малом увеличении микроскопа найти сетку камеры. Перевести микроскоп на большое увеличение и начать подсчет эритроцитов в 5 больших квадратах, которые разделены на маленькие. Лучше всего считать эритроциты в больших квадратах, которые помещаются по диагонали поля зрения. Во время подсчета эритроцитов надо помнить правило Егорова: в маленьких квадратах считать те клетки, которые помещаются как внутри квадрата сетки, так и на его верхней и левой гранях. Это нужно для того, чтобы дважды не считать эритроциты, которые находятся на сторонах сопредельных квадратиков.

Количество эритроцитов в 1 мкл крови рассчитывают по формуле:

X = а*4000*200/80 Где X — количество эритроцитов в 1 мкл; а — количество эритроцитов в 80 маленьких квадратах; 80 - количество подсчитанных маленьких квадратов (5*16=80); 200 — степень разведения крови; 4000 - множитель, который приводит результат объема в 1 мкл крови, поскольку объем маленького квадратика составляет 1/4000 мм (сторона 1/20, а внутри 1/10 мм). Практически количество эритроцитов определяют в 80 маленьких квадратах, полученный показатель умножают на 10000. Для определения количества эритроцитов полученную цифру умножают на 10^6.